细胞免疫荧光步骤是什么

时间:2024-05-20 09:10:07 来源:兼而有之网

细胞免疫荧光步骤是什么

细胞免疫荧光步骤对大家来说一定是细胞很陌生的,他是免疫一种抗原抗体反应,好像对我们来说他显得很遥远的荧光样子,因为我们并不了解他能做什么,步骤通过这种技术可以让我们对抗原或抗体的细胞性质、定位一次来分析出更多的免疫数据。那么细胞免疫荧光步骤是荧光什么呢?

步骤:

1. 细胞一定要贴在玻片上(最好可以放入24孔板),为后面照像打基础。步骤细胞密度适中,细胞大约60-75%满片即可,免疫否则容易脱片。荧光

2. 取出细胞后用4%多聚甲醛固定15分钟,步骤现用现配。细胞(以下各步骤切毋使玻片干燥)

3. PBS冲洗

4. 0.1%Triton作用20分钟

5. PBS冲洗

6. 10%正常血清封闭10分钟

7. 加入一抗,免疫4度孵育过夜(找个小瓶盖将小玻片支起来,荧光抗体就不容易溢出),还要记住“砸片”,就是抗体从较高处落到片子上,以分布均匀。抗体稀释度1:60,较常用!

8. PBS冲洗4次,各5分钟

9加入荧光二抗,室温30分钟。抗体稀释度1:400,较常用!

10. 同8。

11. 90%甘油封片。也很关键阿,多封几次才有体会。

12. 避光保存,或到显微镜下观察。

细胞免疫荧光,这对很多人来说都是第一次听说这个东西,也不知道他对我们会有什么好处与坏处,科学研究就是这样子的,普通老百姓是不会明白其中的道理的,但是这些研究也是确实的在我们的生活中取得了成果,能够让大家过的更加舒适。

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